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CCR2/β-Arrestin/CHO

CBP71394

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I. Background
      CCR2(C-C 趨化因子受體 2 型)是表達于單核細胞、巨噬細胞等免疫細胞表面的 G 蛋 白偶聯(lián)受體(GPCR),具有七次跨膜螺旋結(jié)構(gòu),胞外 N 端含有糖基化位點,胞內(nèi) C 端則 負責信號轉(zhuǎn)導的蛋白相互作用域。人 CCR2 蛋白由 374 個氨基酸構(gòu)成,具有兩個主要剪接 變體:CCR2A 和 CCR2B,其中 CCR2B 是最常見的功能型形式。

      CCR2 的內(nèi)源性配體主要為 CCL2(MCP-1)。當 CCL2 結(jié)合 CCR2 后,通過激活 Gαi 信號通路觸發(fā)下游β-arrestin、MAPK 等級聯(lián)反應(yīng),驅(qū)動免疫細胞向炎癥/損傷部位遷移;在 病理狀態(tài)下,CCR2/CCL2 軸過度激活會促進單核細胞浸潤至組織(如脂肪肝、動脈粥樣斑 塊、腫瘤微環(huán)境),介導慢性炎癥與纖維化,因而成為治療代謝性疾?。∟ASH)、自身 免疫病、疼痛和癌癥轉(zhuǎn)移的熱門靶點。
 
II. Description
      CCR2 β-Arrestin CHO 報告基因藥靶模型很好的模擬了體內(nèi) CCR2/β-Arrestin 的信號轉(zhuǎn) 導過程,原理見下圖所示。當缺乏配體刺激時,β-Arrestin 不與 CCR2 結(jié)合,融合β-Arrestin 的熒光素酶處于失活構(gòu)象,當 CCR2 遭遇配體刺激時,融合熒光素酶報告基因的β-Arrestin 被招募,使熒光素酶報告基因處于激活狀態(tài),加入其底物后發(fā)光信號增強。



Figure 1. 
CCR2 β-Arrestin CHO 細胞模型原理圖
 
III. Introduction
Expressed gene:

CCR2

Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: F12K+10%FBS+5μg/ml Puromycin+5μg/ml Blasticidin
Mycoplasma Status: Negative
Storage: Liquid nitrogen immediately upon delivery
Application(s):

Functional assay for CCR2

Transducer: β-Arrestin
 
IV. Description of Host Cell Line
Organism: Hamster
Tissue: Ovary
Morphology: Epithelial
Growth Properties: Adherent
 
V. Representative Data

Figure 2. Recombinant CCR2/β-Arrestin/CHO constitutively expressing CCR2.

Figure 3. Dose Response of Human CCL2 in CCR2 β-Arrestin CHO(C10).

Figure 4.Inhibition of hCCL2-induced β-Arrestin Recruitment by CCL2 Neutralization Ab in CCR2 β-Arrestin CHO(C10). Inhibition of hCCL2-induced β-Arrestin Recruitment in CCR2 β-Arrestin CHO(C10).
 


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